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高免血清“抗血清”制备和使用简易方法

高免血清“抗血清”制备和使用简易方法

  • 分类:技术指导
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2019-12-16
  • 访问量:1

高免血清“抗血清”制备和使用简易方法

【概要描述】

  • 分类:技术指导
  • 作者:
  • 来源:
  • 发布时间:2019-12-16
  • 访问量:1
详情

  制备高免血清对母猪的选择<-span><-span><-p>

    制备高免血清应选用近期有过典型临床表现且明显康复的母猪:体质健壮,无特殊病原体感染,产仔<-span><-span>6<-span><-span><-span>胎以上,年老、繁殖力下降,无种用价值的淘汰母猪首选。因猪场发病一般从母猪开始,而康复速度也以母猪最快,因此往往能用康复母猪的血清保护到大部分保育猪。<-span><-span><-p>

    制备高免血清程序<-span><-span><-p>

    采血采血应在上午空腹时进行,禁食一夜,可避免血中出现乳糜而获得澄清的血清。将所选择母猪冲洗干净固定于<-span><-span>“X”<-span><-span><-span>型的保定架上,仰卧保定,将猪尾一端垫高,左胸前口剃毛并用碘酒清洗,用酒精脱碘,等酒精挥发后,准备一空心铜管,一端尖、一端平,长<-span><-span>40<-span><-span><-span>厘米、直径约<-span><-span>1<-span><-span><-span>厘米,消毒、烘干后平的一端套硅橡胶管,经消毒的胸前口捅入猪的心脏(不要刺太深,防止完全穿透心脏),放血。<-span><-span><-p>

    接血消毒烘干好的容器(大离心瓶或<-span><-span>500<-span><-span><-span>毫升的注射用生理盐水瓶),将胶管的一头贴住瓶壁,血顺瓶壁流下,装约<-span><-span>400<-span><-span><-span>毫升<-span><-span>~500<-span><-span><-span>毫升(离心瓶依照仪器要求)。<-span><-span><-p>

    取血清离心法:<-span><-span>400×4<-span><-span><-span>离心机按一般血液离心要求进行即可;自然析出:封好瓶口,冷却到室温,放入<-span><-span>4<-span><-span><-span>℃<-span><-span>冰箱过夜,异日取出,取血清,另外装瓶、封口。<-span><-span><-p>

    灭活<-span><-span>56<-span><-span><-span>℃<-span><-span>温箱中<-span><-span>1.5<-span><-span><-span>小时(保证全瓶血清维持在<-span><-span>56<-span><-span><-span>℃<-span><-span>时间至少<-span><-span>1<-span><-span><-span>小时),自然冷却,加入抗生素(一般是双抗,具体剂量还要看各厂的实际情况),有条件的可对血清进行钴-<-span><-span>60<-span><-span><-span>辐照消毒。将血清冷冻保存(随解冻随用,大约可以保存<-span><-span>12<-span><-span><-span>周)。<-span><-span><-p>

    血清的无菌检查血清通过接种琼脂平板,温箱培养看是否有菌落生长,另外,双抗的量加多少可以通过培养情况来确定。<-span><-span><-p>

    安全性实验通过培养无细菌生长的血清注射小猪约<-span><-span>10<-span><-span><-span>头(<-span><-span>5<-span><-span><-span>日龄<-span><-span>~10<-span><-span><-span>日龄)(腹腔注射),观察一周(每日量体温,观察是否发病)如发病务必确诊发病原因。<-span><-span><-p>

    使用方法肌肉注射:小猪<-span><-span>2<-span><-span><-span>毫升、中大猪<-span><-span>3<-span><-span><-span>毫升<-span><-span>~5<-span><-span><-span>毫升,母猪<-span><-span>8<-span><-span><-span>毫升。隔<-span><-span>5<-span><-span><-span>日再注射一次。<-span><-span><-p>

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